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Biomolekulare Interaktionsanalyse (BIA) im elektrophoretischen Fluss

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Biomolekulare Interaktionsanalyse (BIA) im elektrophoretischen Fluss

Michael Kumpf (Unbekannter Einband, Deutsch)

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Optischer Zustand

Beschreibung

Mit einem markierungsfreien Biosensor basierend auf der reflektometrischen Interferenzspektroskopie wird eine biomolekulare Interaktionsanalyse (BIA) durchgeführt. Hierzu werden verschiedene physikalische Konstanten unterschiedlichster Substanzen bestimmt. Einerseits wird gezeigt, dass es zur Charakterisierung der Wechselwirkung von entscheidender Bedeutung ist, die aktive Konzentration zu kennen und nicht nur die Proteinkonzentration. Des Weiteren werden sowohl thermodynamische und kinetische Konstanten bestimmt. Insbesondere wird hierbei festgestellt, dass es einen Unterschied zwischen heterogener und homogener Interaktion gibt. Außerdem wird gezeigt, dass sich der verwendete Biosensor auch zur schnellen Qualitätskontrolle in der Antikörperherstellung eignet, indem mit wenigen Messungen ein Ranking der Aktivität, Affinität und Interaktionsgeschwindigkeit angegeben werden konnte. Darüber hinaus wird dargestellt, dass die reflektometrische Interferenzspektroskopie nicht nur mit einem Interferenzglas Träger, sondern im Prinzip mit allen transparenten Materialien verwendet werden kann. Dies wird an Hand von IndiumZinnOxid (ITO), Titandioxid (TiO2) und dem Polymer Topas dargelegt. Des Weiteren wird am Beispiel der relevanten Substanzklassen DNA und Proteine gezeigt, dass dieser Biosensor als Detektor einer Elektrophorese fungieren kann. Inhaltsverzeichnis 1 Einleitung 1.1 Motivation der Arbeit 1.2 Zielsetzung der Arbeit 2 Theorie 2.1 Biochemische Grundlagen 2.1.1 Biomolekulare Erkennung 2.1.2 Antikörper 2.1.3 DNA und DNA Homologe Verbindungen 2.2 Detektion an Grenzschichten 2.2.1 Kinetisch kontrolliert 2.2.2 Diffusions kontrolliert 2.2.3 Überlagerung von Kinetik und Diffusion 2.3 Optische Grundlagen 2.3.1 Reflexion an Grenzschichten 2.3.2 Reflexion an einer dünnen Schicht 2.3.3 Reflexion an Multischichtsystemen 2.4 Fluidik 2.4.1 Druckgetriebener Fluss 2.4.2 Mischen 2.4.3 Elektrophoretischer Fluss 3 Material und Methoden 3.1 Chemikalien und Lösungen 3.1.1 Chemikalien 3.1.2 Lösungen 3.2 Trägermaterialien 3.3 Rezeptoren und Liganden 3.3.1 Antigen-Antikörper-Wechselwirkung 3.3.2 Biotin-Streptavidin-Wechselwirkung 3.3.3 DNA-DNA-Wechselwirkung 3.4 Oberflächenmodifikation 3.4.1 Reinigung und Aktivierung 3.4.2 Silanisierung 3.4.3 Anbindung einer Polymerschicht 3.4.4 Funktionalisierung mit dem Liganden 3.5 RIfS 3.5.1 Messprinzip 3.5.2 Apparativer Aufbau 3.6 Probenhandhabung 4 Ergebnisse und Diskussion 4.1 Aktive Antik¨orperkonzentration 4.1.1 Bestimmung 4.1.2 Monovalenter Rezeptor 4.1.3 Bivalenter Rezeptor 4.2 Affinitätskonstanten 4.2.1 Bestimmung 4.2.2 Diffusionskontrolliert 4.2.3 Kinetisch Kontrolliert 4.3 Kinetische Konstanten 4.3.1 Bestimmung 4.3.2 Heterogene Wechselwirkung 4.3.3 Homogene Wechselwirkung 4.4 Metalloxid - und Plastikschichten 4.4.1 IndiumZinnOxid ITO 4.4.2 Titandioxid 4.4.3 Topas 4.5 Elektrophorese - RIfS 4.5.1 Biomoleküle in der Elektrophorese 4.5.2 Apparative Kopplung 4.5.3 Betriebsparameter der Elektrophorese – RifS-Kopplung 4.5.4 Interaktion im elektrophoretischen Fluß 5 Zusammenfassung und Ausblick 6 Literaturverzeichnis 7 Anhang Weniger zeigen

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Produktinformationen

Technische Daten

Erscheinungsdatum

13.12.2005

Sprache

Deutsch

EAN

9783938807019

Herausgeber

Rhombos-Verlag

Sonderedition

Nein

Autor

Michael Kumpf

Seitenanzahl

108

Auflage

Einbandart

Unbekannter Einband

Schlagwörter

Biochemie, Antikörperherstellung, Biosensor

Thema-Inhalt

PSB - Biochemie

Höhe

210 mm

Breite

14.9 cm

Warnhinweise und Sicherheitsinformationen

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